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本试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统，从1～1.5mL菌液中分离纯化2～20μg高质量质粒DNA。独特包埋的磁珠，在一定条件下对质粒DNA具有很强的亲和力，而当条件改变时，磁珠释放吸附的质粒DNA，能够达到快速分离纯化质粒DNA的目的，可去除蛋白及其他杂质，从而保证提取质粒的纯度。使用本试剂盒提取的质粒DNA可用于各种分子生物学实验，如酶切、测序、文库筛选、连接和转化等。

• 快捷简便：整个过程无需多次离心，可在1h内完成96个样品提取。
  
• 得率高：独特包埋的磁珠可特异高效的吸附质粒。
  
• 纯度高：可直接用于下游实验，如酶切、测序等。

• 更长时间的保存可置于2～8℃。在2～8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，应在使用前置于37℃下溶解沉淀。
  
• 溶液P1使用前先加入RNase A（加入比例为溶液P1:RNase A = 100:1），混匀，置于2～8℃保存。
  
• 第一次使用前请按照瓶上标签在漂洗液PW中加入相应体积的无水乙醇。
  
• 使用前先检查溶液P2和P3是否出现浑浊，如有混浊现象，可置于37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。溶液P2和P3使用后应立即盖紧盖子。
  
• 所有离心步骤均为室温下进行离心。
  
• 提取的质粒量与细菌的培养浓度、宿主菌、质粒拷贝数等因素有关。
  
• 磁珠悬浮液使用前需充分混匀。

• 集菌步骤：向一个新的96孔深孔板中添加1.0～1.5mL摇好的菌液（或者取摇好菌液的96孔板），加盖封口膜，3600rpm离心10min收集菌体，倒掉培养基，倒扣于吸水纸上除去残留的培养基（如果菌液浓度较低，可以重复集菌一次）。
  
• 向收集好的细菌培养物中加入250μL溶液P1（请先检查是否已加入RNaseA)，加盖新的封口膜，使用漩涡混合器彻底悬浮菌体。
  
• 揭去封口膜，向96孔深孔板中每孔加入250μL溶液P2，加盖新的封口膜，温和地上下翻转6～8次使菌体充分裂解，瞬时离心使封口膜上的水珠落回板中。
  注意：温柔混匀以防有基因组DNA污染。混匀后菌液应变得清亮粘稠，所用时间不应超过5min，以免质粒受到破坏。
  
• 揭去封口膜，向96孔深孔板中每孔加入350μL溶液P3，加盖新的封口膜，立即温和地上下翻转6～8次使其充分混匀，3600rpm离心10min。
  注意：P3加入后应立即混合，避免产生局部沉淀。
  
• 将96孔过滤板和一个新的96孔深孔板叠放在一起，转移步骤4中的上清到对应的96孔过滤板中，3600rpm离心5min。
  
• 向上述96孔深孔板中的每孔加入15μL磁珠悬浮液G，抽打混匀。
  
• 将深孔板室温静置5min，期间抽打混匀一次。
  
• 将深孔板于磁力架上静置30sec，待磁珠完全吸附时倒掉液体。
  
• 将深孔板从磁力架上取下，每孔加入600μL漂洗液PW （请先检查是否已加入无水乙醇)，抽打混匀。
  
• 将深孔板于磁力架上静置30sec，待磁珠完全吸附时倒掉液体。
  
• 重复步骤9、10，液体尽量去除干净。
  
• 深孔板于磁力架上，室温晾干5～10min。
  注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
  
• 将深孔板从磁力架上取下，加入50～100μL洗脱液，涡旋混匀，室温静置5～10min，期间涡旋混匀一次。
  
• 将深孔板放置于磁力架上静置30sec，待磁珠完全吸附时小心将DNA溶液转移并于适当条件保存。
  注意：洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

• 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD₂₆₀值为1相当于大约50μg/ml双链DNA。
  
• OD₂₆₀/OD₂₈₀比值应为1.7～1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，但并不表示纯度低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值。